细胞色素C在apoptin诱导宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用

目的研究肿瘤特异性凋亡基因（apoptin）在诱导Hela细胞凋亡中的信号转导机制。方法用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的Hela细胞;采用MTT法检测Hela细胞的凋亡;以比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性;Western blotting检测凋亡细胞中细胞色素C的表达量。结果 MTT法证明ap-optin基因瞬间转染的Hela细胞凋亡率明显高于其他各组（P〈0.01）;caspase-3的活性升高,但caspase-8活性没有明显变化;细胞色素C释放量明显增多。结论 Apoptin基因可能通过促进线粒体释放细胞色素C激活caspase-3,进而诱导Hela细胞凋亡。     

Vgb在大肠埃希菌中表达及生物活性的研究

目的将vgb克隆到大肠埃希菌表达载体pQE-30中,研究vgb表达产物对细胞摄氧能力的影响。方法利用PCR和基因重组技术克隆vgb与大肠埃希菌表达质粒pQE V,大肠埃希菌转化采用CaCl2法,VHb活性分析采用CO示差光谱法。结果克隆了vgb和重组质粒pQE V,vgb基因在大肠埃希菌中获得表达,在A420 nm处达到典型吸收峰。结论 vgb在大肠埃希菌中表达产物加强了对氧的摄取能力,对解决细胞高密度发酵培养中氧需矛盾、促进代谢产物的产率具有非常重要的应用价值。     

寡核苷酸探针制备的优化

目的:探讨寡核苷酸微阵列制备中适合使用的探针浓度、探针缓冲液pH值、离子强度、优化杂交条件。方法:选取人白细胞抗原DQA1位点,针对多态性集中的外显子2设计一对保守引物及16条特异性分型探针;分别用ddH2O和0.1、0.2mol/L碳酸盐缓冲液(pH=7)稀释探针至100μmol/L;选取合适的缓冲液浓度后,调碳酸盐缓冲液为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0等6种pH值,选取最优pH值及离子强度,分别溶解探针至20、50、100、200μmol/L,比较上述不同条件的杂交结果。结果:用0.1mol/L、pH9的碳酸盐缓冲液溶解探针杂交效果最佳;探针浓度为20μmol/L时信号弱,其他浓度下无显著差别。结论:通过探针制备的优化可以提高杂交效率,探针浓度与杂交信号强度无明显正相关。     

浅谈蚜虫对其高密度种群的适应

蚜虫是一种多态性昆虫,其繁殖量的多少和蚜型的分化在很大程度上受种群密度的影响,当种群的数量达到环境容纳量时,不同种类的蚜虫便会采取各种措施以降低繁殖力,使整个种群的数量基本保持在平衡密度的水平上。这些措施包括分化出缺乏繁殖力的兵蚜,产生有翅蚜迁飞到其他的寄主上以及降低产仔量和缩短寿命等。采取这些策略能够使整个种群避免食物不充足而持续的繁衍下去．是蚜虫对环境适应的一种表现。     

无芽胞厌氧菌、Fas蛋白表达与胃癌相关性的研究

目的探讨无芽胞厌氧菌、Fas蛋白在胃癌及癌旁组织的表达情况及其临床意义。方法无芽胞厌氧菌的检测采用微生物分类鉴定系统中API20A测定方法,Fas蛋白的检测采用免疫组化SP法,分别检测了57例胃癌组织,57例癌旁组织,20例正常胃黏膜组织中微生物的变化及Fas蛋白表达。结果胃癌组织与癌旁组织的无芽胞厌氧菌检出情况不同。胃癌组织检出的主要为革兰阳性无芽胞厌氧菌(优杆菌、丙酸杆菌和消化链球菌等),占检出菌株的6486%(48/74),其中硝酸盐还原试验阳性菌株为5946%(44/74)。癌旁组织检出的主要为革兰阴性无芽胞厌氧菌(类杆菌、梭杆菌、紫单胞菌和韦荣球菌),占检出细菌的5714%(24/42),硝酸盐还原试验阳性菌株为1667%(7/42)。胃癌组织中Fas蛋白表达的阳性率为3509%(20/57),癌旁组织为7018%(40/57),正常胃黏膜为8500%(17/20),胃癌组织与癌旁组织、正常胃黏膜组织Fas蛋白的表达比较,差异均有非常显著性(P<001)。结论胃癌组织与癌旁组织的无芽胞厌氧菌检出情况不同。胃癌组织检出的主要为革兰阳性无芽胞厌氧菌。胃癌组织Fas蛋白水平的表达与癌旁组织、正常胃黏膜组织Fas蛋白的表达比较,差异均有非常显著性(P<001),对阐明胃癌的发生机制、预后和转移均有重要意义。     

甲磺酸甲酯对酵母DNA损伤及端粒酶活性的影响

观察甲磺酸甲酯 (MMS)对酿酒酵母S2 88C细胞染色体DNA的损伤及端粒酶活性的调节。结果表明 ,甲磺酸甲酯引起酵母细胞DNA损伤 ,随着MMS浓度的增加及作用时间的延长 ,DNA损伤程度加重 ,同时明显提高酵母细胞端粒酶活性。当用 0 .4mmol/LMMS作用 72h后 ,端粒酶活性最高 (是对照组的1.4 7倍 ) ,在作用 96h及 12 0h后端粒酶活性逐渐下降 ,但均高于对照组。甲磺酸甲酯对酿酒酵母S2 88C细胞端粒酶活性的上调作用可能与其DNA损伤有关 ,断裂DNA的损伤后修复可能是端粒酶介导的。     

用昆虫细胞表达系统表达人组织激肽释放酶原

目的:利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达proHUK,系统优化表达条件。方法:用改进的方法对昆虫细胞进行了无血清悬浮适应培养,用ELISA、SDS-PAGE方法对各种条件下proHUK的表达量进行检测。结果:Sf-9、Hi-5细胞在血清减量速度为5%、1%,接种密度分别为2×106cells/mL1、×106cells/mL时能很快适应无血清悬浮培养。在病毒感染复度MOI为10,细胞接种密度为1×106cells/mL条件下培养96h后,proHUK的表达量最高可达30mg/L。结论:改进的方法使昆虫细胞能更快适应无血清悬浮生长条件,获得了高表达proHUK的方法,为其大规模制备奠定了基础。     

玉米抗丝黑穗病基因RAPD分析

该文应用RAPD技术,以感病母本3045和抗病父本3024为试材,应用BSA法,对玉米抗丝黑穗病基因进行分析,建立并优化了玉米的RAPD反应体系,筛选了61条引物RAPD随机引物,18条引物为适宜引物,共扩增出89条DNA谱带,得到了4条具有稳定多态性标记的引物,分别为OPY-09、OPY-10、OPY-18、OPP-09。     

大气污染对大鼠呼吸道微生态的影响研究

探讨了大气污染引起呼吸道症状和机体健康效应的作用机理,为防治大气污染及其对机体的损害提供理论依据。采用模拟现实大气污染的方法,分高、中、低浓度用Wistar大鼠制备大气污染动物模型,对大鼠口咽部菌群进行定性、定量、定位检测,动态研究。大气污染大鼠模型口咽部微生态发生改变。与污染前比,肺炎克雷伯杆菌等致病菌检出率明显增加(P<0.05),厌氧菌含量明显减少(P<0.05),并且随着染毒时间厌氧菌和细菌总量都呈明显下降趋势(P<0.05);口咽部菌群含量在一定范围内波动,没有随着染毒浓度改变而呈明显改变。大气污染对呼吸道正常菌群有毒害作用,对微环境有破坏作用,导致微环境改变,正常菌群含量减少,致病菌定植,是呼吸道疾病发病率升高的重要因素之一。     

光合微生态菌剂对种子萌芽及幼苗生长的影响

种子萌芽及幼苗生长试验结果表明,光合微生态菌剂可提高种子萌芽率,促进幼苗根系发育和生长,对苗期病害具有较好的防治效果,稀释50倍的菌剂可有效控制蔬菜苗期立枯病和恶苗病的发病率,防治效果达到70%以上。